本篇中的肉制品,如素肉堡、腌渍鲜嫩鸡胸肉、原味炸鸡、辣味炸鸡、基础风味鸡肉丝、香料鸡排、鸡翅蓉、鸡肉热狗、香草鸡腿排等,在加工过程中添加复杂的佐料进行调味,基质干扰大,这给肉制品中糖的定量分析造成很大困难。
肉制品中糖的定量分析有两个难点:
一、没有现成的定量分析标准方法可以参考。
二、净化不干净的样品溶液上机LC/ELSD后,极易毁坏糖专用色谱柱和堵塞ELSD雾化器,消耗很大的维修成本;
为了解决这个问题,巨研科技研发出FaAEx-AD2糖专用SPE净化柱,摸索出合适的前处理操作步骤和仪器分析条件。
此分析方法通过方法验证后,邀请业内同行进行实践验证,同行反馈FaAEx-AD2糖专用SPE柱的净化效果良好!
本篇将介绍两个肉制品中糖检测的方法:
方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化,以LC/ELSD法分析;
方法二:参考GB/T 9695.31-2008方法,使用分光光度法和直接滴定法分析。
方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化
以泰式調味腿肉片样品为例,测试果糖(Fructose)、山梨醇(Sorbitol)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(Glucose)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)和麦芽糖(Maltose),样品加入10ml的50%乙醇溶液、超声、震荡、定容、离心后取上清液。
将上清液通过FaAEx-AD2糖专用柱除杂(只需一步过柱),获得目标物溶液,过滤后上机到LC/ELSD进行定量分析。
(1)前处理步骤:
样品均质
↓
取1g样品于离心管中,加10 ml 50%乙醇溶液
↓
超声震荡20min
↓
高速震荡10min
↓
以50%乙醇溶液定容至20 mL(固体样品:直接加10mL)
↓
6000rpm离心30min
↓
取10ml上清液过巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱,取滤液上机分析
(无须活化平衡,一步通过法获得目标物)
(2)LC-ELSD分析出谱图如下:
(3)小结:
使用FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化后,再上机分析,有两个好处:
1、果糖(Fructose)、山梨醇(Sorbitol)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(Glucose)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)和麦芽糖(Maltose)这7种糖的回收率在80-120%之间。
2、有效延长糖专用色谱柱的使用寿命,避免堵塞ELSD雾化器,大大降低耗材和配件的损耗成本。
3、前处理中已经进行萃取、超声和离心的净化操作,为什么还要开发FaAEx-AD2 糖专用柱再次除杂?
答:因为离心得到的上清液过滤膜后上机分析,进几针样品后,糖专用色谱柱被污染、ELSD雾化器也很快被堵塞,基本不能进行日常的品控管理。
离心得到的上清液经过FaAEx-AD2 糖专用柱净化后,有效地解决了这个问题,需要在日常做肉制品中糖测试的用户,持续回购FaAEx-AD2 糖专用柱。
方法二:参考GB/T 9695.31-2008标准方法
关于肉制品中总糖的检测,我们有一个标准方法,即:《GB/T 9695.31-2008肉制品 总糖含量测定》,以葡萄糖为对照物。
第一法适用于肉制品中总糖含量的测定,使用分光光度法;
试样中的总糖含量以葡萄糖计。
第二法适用于不含淀粉的肉制品中总糖含量的测定,使用直接滴定法测糖
总结
1、肉制品中糖的检测,若采用GB/T 9695.31-2008标准方法,前处理步骤操作复杂,耗时长,花费大量人力,分析结果的灵敏度比LC/ELSD法低,几乎不能做定量分析。
2、采用LC/ELSD法分析肉制品中的糖含量,难点在于怎么充分去除复杂样品中的杂质。通过在样品中加入10ml的50%乙醇溶液、超声、震荡、定容、离心、过滤这些步骤,回收率尚可,但除杂效果不佳,进样几次后,糖专用色谱柱被污染,甚至ELSD雾化器被堵塞,增加耗材和仪器配件的消耗成本。
3、将离心后的上清液,一步法通过FaAEx-AD2糖专用SPE柱的净化、过滤后上机分析,可有效去除杂质,延长糖专用色谱柱和ELSD的使用寿命,且HPLC基线更加平稳,回收率表现更优(80-120%)。